Laborator

Laborator analize

RT-PCR SARS-CoV-2

Coronavirusurile sunt o familie de virusuri descoperite în anii 1960 care pot provoca boli, cum ar fi răceala comună, sindromul respirator acut sever (SARS) și sindromul respirator din Orientul Mijlociu (MERS). În 2019 a fost identificat un nou coronavirus cunoscut acum sub numele de SARS-CoV-2 și care determină boala COVID-19.

Diagnosticul de laborator pentru cazurilor de COVID-19 se bazează pe detectarea unor secvențe ARN specifice cu ajutorul tehnicilor de biologie moleculară (rRT-PCR). Testarea se efectuează pe probe recoltate din tractul respirator superior.

Laboratorul spitalului dispune de o metodă rapidă automată de diagnosticare RT-PCR în timp real in vitro pentru detectarea directă a ARN-ului SARS-CoV-2 din exudate nazofaringiene și orofaringiene recoltate în mediu de transport. Rezultatele testărilor se elibereaza in 24 ore. Avem un număr de peste 7800 teste moleculare SARS CoV-2 efectuate în perioada februarie –mai 2020.

Anticorpi IgG SARS-COV-2

Laboratorul spitalului are capacitatea de a determina prezența anticorpilor IgG SARS-CoV-2 prin electrochemiluminiscență și tehnica ELISA. Anticorpii pot fi găsiți în sângele persoanelor care au trecut prin infecție și arată existența unui răspuns imun la infecție.

Cu toate acestea, aceste teste au limite privind specificitatea și sensibilitatea. Rezultatele testelor pentru anticorpi nu trebuie utilizate pentru a diagnostica infecția activă SARS-CoV-2. De obicei, durează 1 până la 3 săptămâni de la debutul infecției cu SARS-CoV-2 pentru ca anticorpii să apară; în unele cazuri poate dura mai mult pentru a apariția anticorpilor. În funcție de momentul în care cineva a fost infectat și de momentul testării, este posibil ca testul să nu găsească anticorpi chiar în cazul unei infecții active.

La ora actuală nu șe știe dacă anticorpii care rezultă din infecția cu SARS-CoV-2 oferă imunitate față de o viitoare infecție. Dacă anticorpii oferă imunitate, nu se cunoaște ce titru sau cantitate de anticorpi ar fi protector sau durata pentru care va dura protecția.

Fibrinogenul

FIBRINOGENUL este o proteinǎ sintetizatǎ de ficat. În cursul coagulǎrii se transformǎ sub acţiunea trombinei în fibrinǎ insolubilǎ, care va contribui la formarea cheagului fibrino-plachetar. În contextul explorǎrii coagulǎrii, dozarea fibrinogenului se utilizeazǎ în bilanţul hemostazei, în diagnosticul CID şi al fibrinogenolizei primare.
Fibrinogenul este o proteinǎ de fazǎ acutǎ; el este utilizat ca un marker de inflamaţie (în asociere cu VSH, CRP), în diagnosticarea şi urmǎrirea evoluţiei unor boli inflamatorii.

Cum mă pregătesc pentru recoltare?

Recoltare a jeun (pe nemâncate).

Ce produs biologic se recoltează?

Se recoltează sânge venos, obţinut prin puncţie venoasă.

În ce recipient recoltăm şi care este cantitatea minimă necesară?

Proba se recoltează în vacutainer cu citrat de Na 3,2% (dop albastru) (1), până la semn sau cel puţin 90% din cantitatea optimă(6,7) . Proba se omogenizează prin agitare blânda 3-6 răsturnări uşoare şi complete a eprubetei, pentru a asigura amestecul sângelui cu anticoagulantul şi a evita coagularea probei.

În cât timp trebuie să ajungă proba în laborator?

Proba se transportă la laborator în cel mai scurt timp de la recoltare, între timp se menţine la temperatură camerei.

Cum se prelucrează proba in laborator?

După recepţia în laborator, proba se centrifughează 15 min la 1500g pentru obţinerea plasmei de analizat.

Cât timp şi cum se poate păstra proba în laborator?

Plasma separată după centrifugare poate fi păstrată 72 h la frigider (4 oC) fără modificări semnificative ale valorilor fibrinogenului.

Principiul metodei de analiză:

Metoda Clauss : Plasma citratată este coagulată în prezenţa unui exces de trombină. Trombina transformă fibrinogenul, proteină plasmatică solubilă în fibrină, polimer insolubil. Timpul de coagulare a plasmei diluate este invers proporţional cu concentraţia de fibrinogen a plasmei.

Factori care interferă cu rezultatul analizei:

– nerespectarea proporţiei de 9/1 între sânge şi anticoagulant
– utilizarea unui tip necorespunzător de vacutainer, altul decât cel cu citrat de Na 3,2 % (dop albastru )
– probele necorespunzătoare pentru testare(vacutainer care nu este plin până la semn, proba hemolizată, lipemică sau coagulată) pot să influenţeze rezultatul.
– nerespectarea timpului recomandat de la recoltare până la recepția în laborator
– transport în condiţii improprii
– valori crescute apar in sarcină şi în timpul menstruaţiei

Valori de referinţă

180 – 400 mg/dl

Programările pentru analizele PCR SARS CoV-2 si IgG SARS CoV-2 cu plata se pot face online pe site-ul spitalului sau telefonic la numarul de telefon:0364130155, de luni până vineri între orele:08:00-15:00.
Prelevarea probelor pentru testare se va efectua începând cu data de 18.05.2020, de luni până sâmbătă
între orele 10:30-14:30.
Specimen recoltatPCR SARS CoV-2-tampon nazofaringian/orofaringianIgG SARS CoV-2-sânge venos
Tarife: PCR SARS CoV-2: 290 lei IgG SARS CoV-2: 100 lei
Plata se va face preferabil cu cardul bancar.
Pacientul se va prezenta cu cartea de identitate.
shadow

Hemoleucograma

Ce înseamnă?

Hemoleucograma – metoda prin care se face o determinare cantitativă şi calitativă a elementelor figurate din sânge. Parametrii hemoleucogramei sunt:
● parametrii eritrocitari- număr de eritrocite (hematii), hemoglobină, hematocrit, indici eritrocitari (volum eritrocitar mediu, concentraţie medie de hemoglobină eritrocitară, hemoglobină eritrocitară medie, lărgimea distribuţiei eritrocitare);
● parametrii leucocitari – număr de leucocite, formula leucocitară în valori relative (%) şi în valori absolute (#), pentru neutrofile, eozinofile, bazofile, limfocite şi monocite;
● parametrii trombocitari- număr de trombocite, volum mediu trombocitar, trombocitocrit, lărgimea distribuţiei trombocitare.
Interpretarea rezultatului se face în context clinic, de medicul specialist.

În cât timp se eliberează rezultatul?

• Urgenţă – 30 minute de la preluarea în laborator a probei de sange.
• Rutină – 4 – 24 de ore.

Cum mă pregătesc pentru recoltare?

● Recoltarea se face dimineaţa, pe nemâncate.
● Nerespectarea condiţiilor de recoltare poate duce la rezultate eronate.

Cantitatea minimă necesară?

• 2 ml de sânge venos; se recomandă recoltarea a 3 ml de sânge venos.

În ce recipient recoltăm?

● Vacutainere cu anticoagulant uscat – EDTA de potasiu (K2 sau K3) individualizate prin capace de culoare mov.

Cum se prelucrează proba în laborator?

• Proba recent recoltată se prelucrează în vacutainerul primar.
• Proba păstrată la +2/+8 °C, se readuce la temperatura camerei înaintea testării.
• Nu se testează probele coagulate sau hemolizate.

Cât timp si cum se poate păstra proba în laborator?

• 24 de ore de la recoltare, la temperatura camerei sau la +2/+8 °C.

Principiul metodei de analiză

• Analizoarele efectuează analiza hematologică utilizând metoda de:
– impedanţă RF/DC
– focalizare/focusare hidrodinamică (DC Detection);
– citometrie în flux (cu laser semiconductor);
– metoda spectrofotometrică, pentru hemoglobină

Factori care interferă cu rezultatul analizei

• Gradul de hidratare influenţează rezultatele hemoleucogramei (deshidratarea creşte valorile mascând prezenţa unei anemii, iar hidratarea în exces le scade).
• În sarcină valorile sunt uşor crescute datorită hemodiluţiei.
• Excesul de anticoagulant sau cantitatea insuficientă de sînge recoltat modifica parametrii hemoleucogramei.
• Aglutininele la rece, în titru mare, într-un sânge păstrat la temperatura camerei, determină un numar fals scăzut de eritrocite şi un VEM scăzut (implicit şi hematocritul este scăzut, iar MCH şi MCHC sunt crescute).
• Leucocitoza marcată poate influenţa indicii eritrocitari.
• Număr de eritrocite:
– pot să scadă la recoltarea cu pacientul în poziţie culcat.
– poate creşte in conditii de stres.
– poate creşte, împreună cu hematocritul, după staza venoasă prelungită din cursul puncţiei venoase
– poate creşte după administrarea unor medicamente: corticotropina, glucocorticoizii, danazolul, eritropoietina, antitiroidienele etc.
– fals crescut cand macrotrombocitele pot fi numărate ca eritrocite
• Hemoglobina:
– poate creşte dupa efort fizic intens
– poate creşte după administrarea unor medicamente: gentamicină, methyldopa
– valori fals crescute: hiperlipemia, leucocitoza peste 50.000/μl, trombocitoza peste 1.000.000/μl sau hiperproteinemia.
• Hematocrit:
– valori fals crescute: reticulocitoză, leucocitoză marcată, prezenţa crioglobulinelor sau a macrotrombocitelor.
– valori fals scăzute: hemoliză in vitro, autoaglutinarea, microcitoză.
• Trombocite:
– scad înaintea menstruaţiei şi în sarcină.
– cresc la altitudine, în sezonul rece, după efort fizic intens, traume.
– pot creşte dupa administrarea de: contraceptive orale, gluco-corticoizii
– pot sa scadă după administrarea unor medicamente: acidul acetlsalicilic, diureticele tiazidice, tolbutamida.
– falsă trombocitopenie se poate întâlni în: formare de agregate trombocitare induse de anticoagulantul EDTA, prezenţa trombocitelor gigante, satelitism plachetar, prezenţa aglutininelor la rece.
– falsă trombocitoză se poate datora: eritrocitelor fragmentate, microsferocitelor, fragmentelor leucocitare.

Valori de referinţă

Timpul de protrombină (PT, Timp Quick)

Ce inseamnă?

PT este un test global care explorează calea extrinsică a coagulării ( factorii X, V, VII, II, fibrinogen). Se utilizează :
– de rutină, în cadrul bilanţului general al hemostazei
– pentru monitorizarea tratamentului cu anticoagulante orale
– în explorarea sindroamelor hemoragipare
– explorarea hepatopatiilor
Interpretarea rezultatului va fi efectuată în context clinic, de către un medic specialist.

In cât se eliberează rezultatul?(zile lucrătoare)

Rezultatul se eliberează în decurs de 24h de la primirea probei în laborator.

Cum mă pregătesc pentru recoltare?

Recoltare a jeun (pe nemâncate).

Ce produs biologic se recoltează?

Se recoltează sânge venos, obţinut prin puncţie venoasă.

In ce recipient recoltăm şi care este cantitatea minimă necesară?

Proba se recoltează în vacutainer cu citrat de Na 3,2% (dop albastru) (1), până la semn sau cel puţin 90% din cantitatea optimă (6,7). Proba se omogenizează prin agitare blânda 3-6 răsturnări uşoare şi complete a eprubetei, pentru a asigura amestecul sângelui cu anticoagulantul şi a evita coagularea probei.

In cât timp trebuie să ajungă proba în laborator?

Proba se transportă la laborator în cel mai scurt timp de la recoltare, între timp se menţine la temperatură camerei. Ideal, testarea PT se face in 4 ore de la recoltare (6). Probele pentru determinarea PT sunt stabile 24 de ore la temperatura camerei.

Cum se prelucrează proba în laborator?

După recepţia în laborator, proba se centrifughează 15 min la 1500g pentru obţinerea plasmei de analizat.

Cât timp şi cum se poate păstra proba în laborator?

Probele recoltate pe citrat de sodiu se păstrează închise, la temperatura camerei ( 18-25°C), inclusiv în timpul transportului spre laborator.
Probele de sânge integral nu se păstrează la frigider şi nu se transportă la gheaţă pentru că activarea la rece a F VII poate altera rezultatul analizei.
Probele recoltate pentru determinarea PT sau INR sunt stabile pentru 24 de ore dacă sunt menţinute la temperatura camerei, procesate sau neprocesate – conform CLSI H21-A5.
Dacă testarea pentru PT nu se face în decurs de 24 de ore de la recoltare, plasma se separă prin centrifugare şi se poate păstra 2 săptamâni la -20oC sau mai mult timp la -70 oC.

Principiul metodei de analiză

Metoda coagulometrică. Analizorul automat măsoară timpul de apariţie a cheagului de fibrină după incubarea plasmei de analizat cu o cantitate optimală de tromboplastină şi calciu.

Factori care interferă cu rezultatul analizei

– nerespectarea proporţiei de 9/1 între sânge şi anticoagulant
– utilizarea unui tip necorespunzător de vacutainer, altul decât cel cu citrat de Na 3,2 % (dop albastru )
– calitatea puncţiei venoase: manevrele traumatice care duc la eliberarea de tromboplastină tisulară au ca rezultat scurtarea PT.
– menţinerea prelungită a plasmei la 4°C activează factorul VII , scurtând PT.
– probele necorespunzătoare pentru testare (vacutainer care nu este plin până la semn, proba hemolizată, lipemică sau coagulată) pot să influenţeze rezultatul.
– la pacienţii poliglobulici (Ht>55%), PT ş APTT vor fi fals prelungiţi datoritǎ diluǎrii volumului mic de plasmǎ raportat la volumul obişnuit de anticoagulant.
– nerespectarea timpului recomandat de la recoltare până la recepția în laborator
– transport în condiţii improprii

Valori de referinţă

Timpul de protrombină (PT) se exprimă în:
– secunde
– activitate protrombinică (PT%) – conform curbei de calibrare
– INR – datorită faptului că tromboplastina este un produs biologic, rezultatul testului de determinare a PT poate avea valori diferite pentru aceeaşi probă în funcţie de sursa de tromboplastină utilizată (lotul, producătorul). Pentru a se obţine rezultate comparabile între ele indiferent de originea reactivului, rezultatele sunt exprimate sub forma de INR (International Normalized Ratio).

Parametru Domeniu de referinţă Unitate de masură
PT *
12.4 – 16.5*
Sec
PT%
70-130
%
INR**
0.8 -1.2

* domeniul de referinţă a PT în secunde variază în funcţie de lotul de tromboplastină utilizat
** la pacienţii trataţi cu anticoagulante orale AVK se urmăreşte ca INR să se situeze în intervalul terapeutic indicat de medicul curant, corespunzător afecţiunii pacientului.

Timpul de tromboplastină parţial activată (APTT)

Ce inseamnă?

APTT este un test global care evalueazǎ factorii coagulǎrii de pe calea intrinsecǎ şi comunǎ. Testul se utilizeazǎ:
– de rutinǎ pentru bilanţul hemostazei
– în explorarea sindroamelor hemoragipare ( boalǎ von Willebrand, hemofilii)
– pentru supravegherea tratamentului cu heparine nefracţionate
Interpretarea rezultatului va fi efectuată în context clinic, de către un medic specialist.

În cât se eliberează rezultatul? (zile lucrătoare)

Rezultatul se eliberează în decurs de 24h de la primirea probei în laborator.

Cum mă pregătesc pentru recoltare?

Recoltare a jeun (pe nemâncate).

Ce produs biologic se recoltează?

Se recoltează sânge venos, obţinut prin puncţie venoasă.

În ce recipient recoltăm şi care este cantitatea minimă necesară?

Proba se recoltează în vacutainer cu citrat de Na 3,2% (dop albastru), până la semn sau cel puţin 90% din cantitatea optimă) (6,7). Proba se omogenizează prin agitare blândă 3-6 răsturnări uşoare şi complete a eprubetei, pentru a asigura amestecul sângelui cu anticoagulantul şi a evita coagularea probei.

În cât timp trebuie să ajungă proba în laborator?

Proba se transportă la laborator în cel mai scurt timp de la recoltare, între timp se menţine la temperatura camerei (6). Ideal, testarea APTT se face in 4 ore de la recoltare (1,6).
Pentru monitorizarea tratamentului cu heparine nefracţionate proba se va centrifuga în maxim 1 oră de la recoltare (în caz contrar FP4 eliberat de trombocite neutralizează heparina şi se vor obţine valori fals scăzute ale APTT ) (2,6)

Cum se prelucrează proba în laborator?

După recepţia în laborator, proba se centrifughează 15 min la 1500g oentru obţinerea plasmei de analizat.

Cât timp şi cum se poate păstra proba în laborator?

Probele recoltate pe citrat de sodiu se păstrează închise, la temperatura camerei ( 18-25°C), inclusiv în timpul transportului spre laborator.
Probele de sânge integral nu se păstrează la frigider şi nu se transportă la gheaţă
Dacă testarea pentru APTT nu se face în decurs de 4 de ore de la recoltare, plasma se separă prin centrifugare şi se poate păstra 2 săptamâni la -20oC.

Principiul metodei de analiză

Metoda coagulometrică. Analizorul automat măsoară timpul de apariţie a cheagului de fibrină după adăugarea de calciu la o plasmă incubată cu o cantitate optimală de fosfolipide şi activator de suprafaţă.

Factori care interferă cu rezultatul analizei

– nerespectarea proporţiei de 9/1 între sânge şi anticoagulant
– probele necorespunzătoare pentru testare (vacutainer care nu este plin până la semn, proba hemolizată, lipemică sau coagulată) pot să influenţeze rezultatul.
– la pacienţii poliglobulici (Ht>55%), PT şi APTT vor fi fals prelungiţi datoritǎ diluǎrii volumului mic de plasmǎ raportat la volumul obişnuit de anticoagulant.
– nerespectarea timpului recomandat de la recoltare până la recepţia în laborator
– transport în condiţii improprii
– este contraindicată recoltarea probei de pe cateter heparinizat sau din braţul la care s-a administrat perfuzie cu heparină.

Valori de referinţă

APTT: 22,7 – 31,8 sec

VSH

Ce înseamnă?

Viteza de sedimentare a hematiilor (VSH) este un test screening, nespecific, care furnizează informaţii generale cu privire la prezenţa sau absenţa inflamaţiei în organism.

Interpretarea rezultatului se face în context clinic, de un medic specialist. În cât timp se eliberează rezultatul?

• Urgenţa – 30 minute de la preluarea în laborator a probei de sânge.
• Rutina – 4 – 24 de ore.

Cum mă pregătesc pentru recoltare?

● Recoltarea se face dimineaţa, pe nemâncate.
● Nerespectarea condiţiilor de recoltare poate duce la rezultate eronate.

Cantitatea minimă necesară?

• 2 ml de sânge venos; se recomandă recoltarea a 3 ml de sânge venos.

În ce recipient recoltăm?

● Vacutainere cu anticoagulant uscat – EDTA de potasiu (K2 sau K3) individualizate prin capace de culoare mov.

Cum se prelucrează proba în laborator?

• Se prelucrează proba recent recoltată, în vacutainerul primar.
• Proba păstrată la +4/+8 °C, se readuce la temperatura camerei înaintea testării.
• Nu se testează probele coagulate sau hemolizate.

Cât timp şi cum se poate păstra proba în laborator?

• 4–6 ore de la recoltare, la temperatura camerei.
• 24 de ore dacă este păstrată la +4/+8 °C.

Principiul metodei de analiză

• Metoda de determinare se bazează pe proprietatea eritrocitelor din sângele tratat cu anticoagulant de a sedimenta in vitro, sub acţiunea forţei gravitaţionale.
• Metoda automata – analiza cinetică a fluxului capilar stopat fotometric

Factori care interferă cu rezultatul analizei

• VSH-ul poate fi crescut datorită refrigerării probei înainte de măsurare și neaducerea ei la temperatura camerei înaintea testarii
• VSH-ul poate fi scăzut dacă temperatura ambiantă în care se determină analiza este mai mare de 24°C.
• Manevrele traumatice din timpul puncţiei venoase duc la coagularea sau hemolizarea eşantionului de sânge recoltat.
• Suprainfecţia sângelui după menţinerea prelungită a probei la temperatura camerei.

Valori de referinţă

• sub 15mm/h – bărbat
• sub 20mm/h – femeie

Echipa medicala